健脾益肾颗粒对小鼠前胃癌术后的影响

健脾益肾颗粒在临床上已使用二十余年，是中医泰斗余桂清的经典名方，治疗胃癌术后的脾气虚弱效果较好，胃癌患者根治性治疗之后多出现脾气亏虚。此外,患者虽然进行了根治性治疗,但体内仍残存着肿瘤细胞或突变基因,这些突变基因可能先天亏虚所致,日久肿瘤细胞仍会生长繁殖、转移、复发。肾为先天之本,脾胃为后天之本。中国中医科学院广安门医院肿瘤科针对肿瘤患者根治性治疗之后的特点制定了健脾益肾的中医治则。本实验在过去实验和临床研究基础上进一步采用具有淋巴道转移的小鼠前胃癌模型,在小鼠的爪垫皮下移植后,待原发瘤生长到一定大小时手术切除原发瘤,再应用健脾益肾颗粒进行治疗,观察其对局部复发和远处转移的治疗作用及对生存期的影响。结果如下： 一、术后15 d 前胃癌615 小鼠术后肺转移抑制作用 在原发瘤切除后,连续给药15 d ,在术后15 d时全部处死小鼠,检查肺转移情况。模型组、化疗组和健脾益肾方治疗组肺转移率分别为94. 4 %、73. 7 %和68. 4 %;化疗组转移抑制率为21. 9 % ,健脾益肾颗粒治疗组为27. 5 %。健脾益肾颗粒治疗组和化疗组转移率与模型组相比差异无统计学意义( P > 0. 05) ,但治疗后转移率低于模型组。从转移程度来看,健脾益肾颗粒治疗组和化疗组与模型组相比差异有统计学意义。 　　说明健脾益肾颗粒对615 小鼠前胃癌术后肺转移有一定的抑制作用,而且可以推迟肺转移。病理切片HE 染色显示:模型组肺内广泛分布10 个以上转移灶,而且有大转移灶存在,整个肺叶由瘤组织取代。健脾益肾方治疗组和化疗组转移灶数量比模型组减少,直径减小,散在分布。 二、术后15 d 前胃癌615 小鼠术后复发瘤抑制作用　 模型组、化疗组和健脾益肾方治疗组复发瘤瘤质量分别是(1. 01 lusm0. 93) 、(0. 26 lusm0. 52) 和(0. 35 lusm0. 35) g ,健脾益肾方治疗组和化疗组与模型组相比差异有统计学意义( P < 0. 01) 。模型组、化疗组和健脾益肾方治疗组复发率分别是94. 44 %、68. 42 %和78. 95 % , 三组相比差异无统计学意义( P >0. 05) 。 　　健脾益肾颗粒治疗组复发瘤抑制率为65. 35 %,化疗组为74. 26 %。实验结果表明健脾益肾颗粒和52FU均可明显降低前胃癌在615 小鼠下肢局部复发。 三、　前胃癌615 小鼠生存期观察　 与模型组相比,健脾益肾方治疗组与化疗组荷瘤小鼠术后生存期及中位生存期明显延长, 生命延长率为100 %和64. 71 % ,以健脾益肾颗粒治疗组效果更明显。从Kaplan2Meier 曲线图,能清晰看出不同的变化趋势。 3 　讨　论 本课题实验动物选择近交系615 小鼠,其造价低、饲养简便、生命力强,同时考虑还要观察健脾益肾中药对细胞免疫的干预作用,因此未选用裸鼠,有利于推广应用。本课题选用将前胃癌细胞接种于615 小鼠后肢爪垫皮下,有利于研究者肉眼直接观察原发瘤侵袭程度,随时在适当的时间行截肢术,比将肿瘤接种于原位的方法操作简单易行。只要原发瘤结扎紧,截肢后一般出血极少,伤口无需特殊处理,术后1～2 d 恢复完好,此术式对动物损伤小,耐受性好。胃癌的扩散以直接浸润蔓延及淋巴道转移为主,晚期也可发生血行及种植转移。爪垫皮下移植,是获得淋巴道转移的最佳途径,该模型为肺高转移肿瘤模型,较好地模拟了胃癌淋巴转移的方式。建立615 小鼠前胃癌术后复发转移模型也将为评估、规范临床用药及深入研究中医药影响肿瘤转移复发的作用机制奠定基础。 从本研究结果看,健脾益肾方对手术后局部肿瘤复发及肺转移有一抑制作用,虽然转移率和复发率与模型组差异无统计学意义,但对复发和转移程度的控制较模型组差异有统计学意义。健脾益肾方治疗组生存期和生存质量都明显优于模型组和化疗组,术后无论中药治疗期间还是治疗后小鼠毛色光泽,活动灵活,即使出现复发转移时,其状态比模型组和化疗组要好。说明健脾益肾中药具有防治肿瘤复发和转移、提高肿瘤患者生活质量、延长生存期的作用。