肿瘤基因在胃癌中的表达研究

　　胃癌的发生与发展涉及多个癌基因的活化和抑瘤基因的失活，后者包括染色体上某些位点等位基因的杂合性丢失以及抑瘤基因的突变等。但胃癌发病的分子机制迄今尚未得到阐明。NAG6是我们采用EST介导的定位候选克隆策略从7q31?32这个多种肿瘤共同缺失区克隆的新基因，Geank基因登录号为：AF156971。对该基因功能的初步研究发现它在鼻咽癌活检组织和鼻咽癌上皮细胞株中表达下调甚至缺失。为了更进一步了解NAG6基因在胃癌中是否存在基因结构改变导致基因表达异常，我们采用了RFLP分析方法，旨在为胃癌多基因遗传的分子本质提供新的分子生物学证据。 　　NAG6为我们最近采用定位候选克隆策略从多种肿瘤共同缺失区7q31?32区域所克隆出的肿瘤相关新基因。用它的全长cDNA序列在Geank中搜索，未发现任何同源性基因；用这个基因ORF核苷酸编码的氨基酸序列在Swi?prot蛋白数据库中也未发现任何同源性蛋白质，说明NAG6基因是全新的基因，已获美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)收录，基因登录号分别为AF156971。利用Scarosite软件预测该基因蛋白产物有4个PKC磷酸化位点，推测NAG6基因的活化可能受磷酸化作用的调控。对它的初步研究发现，该基因在鼻咽癌活检组织中表达明显下调，它在鼻咽癌中表达下调可能与遗传物资的丢失和基因的高甲基化等因素有关。因此推测NAG6基因可能为鼻咽癌的一个抑瘤基因侯选者,该基因的表达下调在鼻咽癌的发生发展中起到一定的作用。 　　而近年细胞遗传学和分子遗传学研究亦证实，人类7号染色体的长臂上某些位点高频率的等位基因杂合性缺失（Lo of heterozygosity，LOH）现象是胃癌中常见分子事件。Nishizuka等检测了53例胃癌患者7q区域的LOH，发现其缺失频率为34%（18/53）；Kuniyasu等利用5个多态性标志物检测98例胃癌患者7q的缺失情况，发现32%（26/98）的患者中存在一个或多个位点的LOH；夏建川等检测了28例原发性胃癌患者，发现7号染色体的缺失是原发性胃癌的特征性结构改变。并且许多进一步的研究确定7q32?qter是7号染色体上最常见的高频率的LOH区域,推测该区域可能存在与胃癌相关的一个或多个候选抑瘤基因，此区域的基因缺失与胃癌发生具有密切关系。NAG6基因定位于胃癌最常见的染色体改变区域，是否在胃癌中也存在类似鼻咽癌中的表达差异，是否参与胃癌的发生发展目前尚未见报道。我们研究发现，NAG6在胃癌组织中存在高频率的表达缺失（ P＜0.005），点杂交亦证实此基因在胃癌中表达明显降低。提示NAG6可能为与胃癌相关的候选抑瘤基因，此基因缺失可能为胃癌发生过程中一个重要的遗传事件，与胃癌的发生关系密切。但NAG6基因表达下调与组织类型以及有无淋巴结或远处转移无显著相关（P＞0.05），提示此基因的改变可能发生于胃癌的早期，而未参与胃癌的侵袭转移。 　　为了研究NAG6基因在胃癌中表达下调的原因，我们采用RFLP分析方法检测该基因在胃癌组织中是否存在基因结构改变。结果发现与癌旁组织比较，NAG6基因在3例的胃癌组织基因组DNA中丢失5.0kb这个等位基因片段；在以往的研究中也曾发现NAG6基因在6例鼻咽癌活检组织中丢失3.0kb这个等位基因片段（与配对的外周血对比）[5]。这些结果说明该基因在这两种恶性肿瘤中存在基因结构改变，初步推测遗传物质的丢失可能是它在胃癌中表达下调的原因之一。 　　综上所述，NAG6基因在胃癌组织中表达显著下调，并且该基因在胃癌中还存在遗传物质丢失，推测它可能为定位于7q31?32区域的与胃癌和鼻咽癌相关的一个侯选抑瘤基因。NAG6基因在胃癌中的缺失必将导致其所处的特定生化通路平衡失调，促进胃癌的发生、发展，但该基因抑瘤机制尚未完全明了。目前我们正在深入研究该基因的功能。>gtgt;推荐阅读：

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