长江学者最新文章解析抑癌基因

   且在结肠癌细胞中成功表达Fhit蛋白，发现在结肠癌细胞中，Fhit基因可能扮演抑癌基因的角色。
    领导这一研究的是第四军医大学杨安钢教授，其早年毕业于新乡医学院，历任第四军医大学生化与分子生物学教研室助教、讲师、副教授、副主任，现任第四军医大学免疫学教研室主任、教授，博士生导师。国家杰出青年基金获得者，1999年被聘为教育部“长江学者奖励计划”特聘教授。





脆性组氨酸三联体(fragile histindine triad,FHIT)基因是1996年Ohta等用外显子捕获法(exon trapping)确定并克隆出来的人类因。FHIT存在于大多数正常组织中，研究发现，FHIT基因在人类多种恶性肿瘤及多种恶性肿瘤细胞系中呈现高频率的纯合缺失、杂合缺失(1oss of het-erozygosity,LOH)或异常转录，因此FHIT基因被拟定为抑癌基因并成为近年来的研究热点。



在这篇文章中，研究人员利用PCR方法从人胎肝文库中克隆Fhit基因片段，Fhit基因PCR产物连入T载体构建重组质粒pMD18T-Fhit。测序正确后，将基因片段导入ptrack-CMV穿梭质粒中，构建重组穿梭载体ptrack-CMV-Fhit。将经PmeⅠ 单酶切线性化的ptrack-CMV-Fhit和骨架腺病毒质粒pAdEasy-1共转BJ5183大肠杆菌，使ptrack-CMV-Fhit和pAdEasy-1发生同源重组。经PacI酶切鉴定正确后,将重组腺病毒质粒转染293A细胞获得表达Fhit蛋白的重组腺病毒rAd-Fhit，将获得的重组腺病毒感染结肠癌细胞，采用蛋白印迹法检测外源Fhit蛋白的表达，并进一步观察其对细胞增殖能力的影响。



这样研究人员成功构建了携带有Fhit基因的重组腺病毒，且能够在结肠癌细胞中成功表达Fhit蛋白。在结肠癌细胞中，Fhit蛋白明显减弱了结肠癌细胞的增殖能力。他们认为，在结肠癌细胞中，Fhit基因可能扮演抑癌基因的角色，而表达Fhit的重组腺病毒很可能成为一种结肠癌生物治疗的新策略。



作为一个抑癌基因，Fhit基因与细胞中许多重要信号通路中的分子存在相关性。例如，在非小细胞肺癌中，Fhit可以通过降低MDM2的活性，起到稳定p53的作用，从而发挥与p53协同抑制肿瘤细胞增殖的功能。在胰腺癌中，Fhit可以影响一系列调控细胞周期的分子，在Fhit高表达的细胞中，cdc2和CyclinD3表达水平增高，而Bcl－2则降低，滞留在G0/G1的细胞增多，发生凋亡的细胞也有所增加，说明 Fhit可以通过调节细胞周期阻滞和细胞凋亡相关分子的功能来抑制肿瘤的发生与进展。



由此看出，Fhit分子通过和细胞中许多重要分子的相互作用影响细胞功能，这项研究构建携带有Fhit基因的重组腺病毒，且在结肠癌细胞中成功表达Fhit蛋白，发现在结肠癌细胞中，Fhit基因可能扮演抑癌基因的角色。这对于Fhit基因的研究，以及结肠癌生物治疗具有重要的意义。