羟喜树碱细胞凋零实验

　　胰腺癌是一预后极差的恶性肿瘤,目前对其治疗仍缺乏有效的手段。喜树碱类药物是从我国特有的喜树中提取的生物碱,是拓扑异构酶的抑制剂,其在肿瘤防治中的作用及机制已引起众多研究者的关注。

　　研究羟喜树碱 (HCPT)体外抑制人胰腺癌细胞株 SW- 1990增殖并诱导其凋亡的作用。

        方法 :体外培养的胰腺癌细胞经不同质量浓度 (1.5 6 2 5 ,3.12 5 ,6 .2 5 ,12 .5 ,2 5 ,5 0 ,10 0μg/ m l)的 HCPT处理 2 0～ 2 4h后 ,用 MTT法测定细胞增殖情况 ,再分别以 Annexin 早期凋亡检测试剂盒、电子显微镜、流式细胞术和 TU NEL标记以及 bcl- 2免疫细胞化学标记检测细胞凋亡情况。

　　结果 :

　　(1) 3.12 5～ 10 0μg/ ml HCPT作用 2 4h后 ,肿瘤细胞的增殖抑制率均非常显著高于对照组 (P0 .0 1)。

　　(2 ) 5 0μg/ m l HCPT作用 2 0 h后 ,经流式细胞术及 TUNEL标记检测 ,肿瘤细胞的凋亡率分别为 13.2 %和 15 .3% ;10 0μg/ m l HCPT作用 2 0 h后 ,两种方法检测的细胞凋亡率分别为 2 6 .1%和 2 8.4%。

　　(3)电镜及 Annexin 标记荧光检测观察表明 ,5 0μg/ m l HCPT作用下 ,肿瘤细胞主要呈早期凋亡表现 ,凋亡率为 18.4%。

　　(4 ) 5 0μg/ ml HCPT作用 2 4h后 ,肿瘤细胞bcl- 2表达较对照组明显减弱。 结论 :HCPT在体外可抑制 SW- 1990细胞的增殖 ,部分作用机制是诱导细胞凋亡 ;提示 HCPT可作为细胞凋亡诱导剂用于胰腺癌的治疗。